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標(biāo)臣動(dòng)態(tài)  》

標(biāo)臣動(dòng)態(tài)

 

VDSpher 精睿/經(jīng)典反相液相色譜分析柱

 

       根據(jù)流動(dòng)相和固定相相對(duì)極性不同，液相色譜分為正相色譜和反相色譜。如果采用固定相的極性大于流動(dòng)相的極性，就稱為正相色譜。由于極性化合物更容易被極性固定相所保留，所以正相色譜系統(tǒng)一般適用于分離極性化合物，極性小的組分先流出。正相色譜主要適用于非極性至中等極性的中小分子化合物的分離，在生化分析中主要應(yīng)用于脂溶性維生素、甾體激素、醫(yī)藥等的分離分析；在農(nóng)藥、石油化工、精細(xì)化工、環(huán)境分析等方面也有廣泛的應(yīng)用。
正相色譜基本上可以被看做是液固吸附色譜，其柱填料是吸附劑，其表面上分布有活性吸附位點(diǎn)，溶劑和溶質(zhì)分子均能被吸附于活性位點(diǎn)上。由于相互作用力有大有小，溶劑分子與溶質(zhì)分子、溶質(zhì)分子相互之間又存在競(jìng)爭(zhēng)吸附，從而造成了在柱內(nèi)保留時(shí)間的差異，使不同物質(zhì)得到分離。
       正相色譜一般用來分離中性化合物和離子(或可電離的)化合物，而且以中性樣品為主。適于分離樣品如下：①對(duì)于反相色譜法很難分離的異構(gòu)體，可以采用以硅膠為固定相的正相色譜分離分析。②根據(jù)被分離樣品極性差別進(jìn)行族類分離。③易于水解樣品的分離分析。④分離分析高脂溶性樣品，其在極性有機(jī)溶劑中溶解度很小。⑤正相色譜也可以用于異構(gòu)體分離（包括幾何異構(gòu)體和光學(xué)異構(gòu)體）。
       正相色譜是采用極性固定相（如帶有二醇基、氨基、和氰基的固定相及硅膠），非極性流動(dòng)相（如正己烷等）的分離方法。這是一種根據(jù)分子的極性大小將其分開的液相色譜技術(shù)，因?yàn)檎嗌V以吸附效應(yīng)作為分離的基礎(chǔ)，所以也稱為吸附色譜。在正相色譜中，樣品分子與載體基質(zhì)的硅醇基團(tuán)發(fā)生特異的極性相互作用，與固定相產(chǎn)生強(qiáng)極性相互作用的極性樣品分子比較難被洗脫，在柱內(nèi)停留比較長的時(shí)間。反之極性較弱或非極性分子與硅膠之間產(chǎn)生相對(duì)較弱的相互作用，比較容易被洗脫，因而在柱內(nèi)停留的時(shí)間較短。因此，正相色譜可以根據(jù)溶劑極性差別而達(dá)到分離的目的。
       優(yōu)良的正相色譜填料，應(yīng)當(dāng)具有以下基本特性：
①     表面具有極性活性基團(tuán)即吸附位點(diǎn)
②     具有適宜形狀，最好呈微米級(jí)微球形，且粒徑分布均勻
③     具多孔性并有高比表面積，以承載較大的樣品負(fù)荷
④     在操作條件下化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定
⑤     具有高機(jī)械強(qiáng)度
       在吸附色譜中最常用的填料是硅膠，硅膠的吸附選擇性可以表現(xiàn)為多種形式，如分子量或分子尺寸選擇性、功能團(tuán)選擇性、形狀選擇性、異構(gòu)體選擇性以及生化選擇性等，影響吸附劑選擇性的參數(shù)有：比表面積、平均孔徑和表面活性。表面活性是正相色譜中作為填料的硅膠的一個(gè)重要參數(shù)，它主要依賴于表面硅羥基的類型、分布及其反應(yīng)性。完全羥基化的表面具有最大的反應(yīng)性，表面吸附的水或其他極性化合物，即使是極少量也會(huì)明顯地降低表面活性。此外，比表面積相對(duì)較低的大孔硅膠，其表面硅羥基的分布一般較為均一。這是因?yàn)椋谒鼈兊闹圃爝^程中，通過熱處理或燒結(jié)已使其無定形表面部分地具有能晶形的特征。微孔硅膠的表面不確定性較高，故其表面活性比大孔硅膠要高。
       極性鍵合相系以硅膠為基質(zhì)，表面鍵合以極性基團(tuán)，如一NH基、一CN基、一CH(OH)一CH2OH基等而制成的填料，分別稱為氨基、氰基、二醇基鍵合相填料，但其配基濃度一般較反相為低。依據(jù)表面修飾試劑和反應(yīng)條件的不同，表面修飾層的濃度約在2～4 mol/m2。性鍵合相的配基比較復(fù)雜，因此在不同的流動(dòng)相中會(huì)顯示出不同的特性。與硅膠相比，上述極性化學(xué)鍵合相填料屬于中等極性填料。由于有機(jī)配基對(duì)于硅膠表面的修飾，掩蔽了具有極高活性的硅羥基，使得極性化學(xué)鍵合相填料的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性有了較高的提高。極性鍵合相的極性通常弱于硅膠，所以更適于對(duì)中等極性物質(zhì)的分離，其色譜條件選擇的方便性和重復(fù)性均優(yōu)于硅膠。在極性鍵合相色譜填料中，研究較多的是氨基鍵合相填料，它的吸附過程與Si02相似但又有所不同。由于氨基的極性比硅羥基弱，且氨基位于烷基鏈末端，有一定的自由度（這與Si02不同)，加之氨基濃度亦較硅羥基濃度小，僅為2 mol/m2左右，故同一溶質(zhì)于相同條件下在氨基柱上的保留要小一些，在分離酸性化合物，如酚、羧酸、核苷酸時(shí)較為有用。此外氨基鍵合相填料對(duì)某些物質(zhì)的特定基團(tuán)會(huì)表現(xiàn)出優(yōu)異的選擇性，例如可以用乙腈一水為洗脫劑在氨基鍵合相柱子上分離單糖。氰基柱對(duì)幾何異構(gòu)體或含雙鍵數(shù)目不同的化合物（環(huán)狀化合物）具有較好的分離能力。二醇基填料具有良好的生物相容性，更適于生化體系的分離，多數(shù)以硅膠為基質(zhì)的凝膠過濾介質(zhì)，均采用了二醇基填料。
       德國VDS Optilab色譜技術(shù)公司是具有31年開發(fā)和生產(chǎn)液相色譜柱經(jīng)驗(yàn)的企業(yè)，特別是運(yùn)用正相液相色譜分離小分子化合物，產(chǎn)品品種和優(yōu)化的選擇更全面。用于小分子化合物色譜分離的C18固定相種類有9種、C8固定相種類有9種，按照硅膠純度不同，區(qū)分VDSpher（經(jīng)典）和VDSpher PUR（精睿）兩大系列，是同類產(chǎn)品線領(lǐng)域中最全供應(yīng)商之一。
 
VDSpher 經(jīng)典/精睿正相液相色譜填料
 
1、正相液相色譜填料種類：
正相液相色譜填料
正相液相色譜填料鍵合類型
端基封尾技術(shù)
Silica
---
no endcapping（不封尾）
Diol
二醇基
no endcapping（不封尾）
CN
氰基
no endcapping（不封尾）
CN-SE
氰基
Gas phase endcapping（全封尾）
NH2
氨基
no endcapping（不封尾）
AP
no endcapping（不封尾）
DAP
弱陰離子交換基團(tuán)
no endcapping（不封尾）
PEI
弱陰離子交換基團(tuán)
no endcapping（不封尾）
 

2、CN液相色譜填料性能-高柱效：119,000/m，當(dāng)今常規(guī)正相液相色譜柱最高柱效的代表。

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VDSpher PUR 精睿正相液相色譜分析柱-色譜分離的最全裝備
 

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