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VDSpher 精睿/經典反相液相色譜分析柱
根據流動相和固定相相對極性不同,液相色譜分為正相色譜和反相色譜。流動相極性大于固定相極性的情況,稱為反相色譜。非極性鍵合相色譜可作反相色譜,在現代液相色譜中應用最廣泛,現代液相色譜分析工作的70%以上是在非極性鍵合固定相上進行的。
反相色譜是指利用非極性的反相介質為固定相,極性有機溶劑的水溶液為流動相,根據溶質極性(疏水性)的差別進行溶質分離與純化的洗脫色譜法。反相色譜中溶質也通過疏水性相互作用分配于固定相表面,但是反相色譜固定相表面完全被非極性基團所覆蓋,表現出強烈的疏水性。因此,必須用極性有機溶劑(如甲醇、乙腈等)或其水溶液進行溶質的洗脫分離。
溶質在反相介質上的分配系數取決于溶質的疏水性,一般疏水性越大,分配系數越大。當固定相一定時,可以通過調節流動相的組成調整溶質的分配系數。反相色譜主要應用于相對分子質量低于5000,特別是1000以下的非極性小分子物質的分析和純化。
反相介質的商品種類繁多,其中最具代表性的是以硅膠為載體,通過表面鍵合非極性分子層制備。通過控制反應時間和溫度,可獲得性能穩定的反相介質。在硅膠基質的反相填料中,以鍵合有C18、C8、C4的球形多孔填料最為常見,用途最廣。反相色譜固定相大多是硅膠表面鍵合疏水基團,基于樣品中的不同組分和疏水基團之間疏水作用的不同而分離。
色譜柱是HPLC系統非常關鍵的一部分,隨著色譜技術的發展,它也不斷地更新換代,長度變得越來越短,填料顆粒也越來越細。現在常用的色譜柱長度在30~250 mm,顆粒直徑在1.6~5μm。顆粒類型主要有全多孔和表面多孔,全多孔填料具有更大的柱容量、更多鍵合相選擇的優點,表面多孔具有反壓低、峰形好的優點。
目前最常用的基質是硅膠。以前填料純化技術不是很成熟,十八烷基鍵合到硅膠表面不是很完全,硅膠上總是少量的硅羥基裸露在外面。這樣就造成樣品在進行色譜分離的時候,會吸附或者鍵合在這部分硅羥基上,導致色譜峰拖尾。使用三乙胺作為封尾劑,先行與硅羥基吸附,可以使峰型改善,這個三乙胺曾經一度成為分析界的寶貝和機密。現在制造填料的技術日趨成熟,人們已經掌握了把這部分剩余未鍵合硅膠也進行鍵合鈍化的技術,這個技術就叫作封尾。
現在每家色譜柱的制造商都有其獨特的鍵合技術,常規的鍵合基團有C18、C8、C4、苯基、氨基、氰基、硅膠等。C18和C8色譜柱是目前最常用、每個實驗室必備的通用型色譜柱。填料是硅膠基質上鍵合十八烷基、辛烷基,有較高的碳含量和較好的疏水性,適用于大多數化合物,包括非極性、極性小分子及一些多肽及蛋白質。隨著每家色譜柱制造商的研發,C18和C8柱的類型還在不斷增加。適用pH范圍由原來的2~8,發展到現在1~14,與純水相的兼容性越來越好,某些色譜柱即使長時間使用100%水相,也不會發生填料疏水塌陷。對于每位實驗人員來說,可供選擇的范圍日趨廣泛。
德國VDS Optilab色譜技術公司是具有31年開發和生產液相色譜柱經驗的企業,特別是運用反相液相色譜分離小分子化合物,產品品種和優化的選擇更全面。用于小分子化合物色譜分離的C18固定相種類有9種、C8固定相種類有9種,按照硅膠純度不同,區分VDSpher(經典)和VDSpher PUR(精睿)兩大系列,是同類產品線領域中最全供應商之一。
VDSpher 經典/精睿反相液相色譜填料
1、反相液相色譜填料種類:
反相液相色譜填料 |
反相液相色譜填料鍵合類型 |
端基封尾技術 |
C18-E |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
C18-SE |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
C18-M |
Polymeric bonding(聚合物層鍵合) |
no endcapping(不封尾) |
C18-M-E |
Polymeric bonding(聚合物層鍵合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
C18-M-SE |
Polymeric bonding(聚合物層鍵合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
C18-H |
Monomeric bonding(單層鍵合) |
Polar spacer(極性官能團嵌入) |
C18-NE |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
no endcapping(不封尾) |
OptiAqua C18 |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
special polar endcapping(獨特封端) |
OptiAqua C18 LL |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
special polar endcapping(獨特封端) |
C8-E |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
C8-SE |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
C8-M |
Polymeric bonding(聚合物層鍵合) |
no endcapping(不封尾) |
C8-M-II |
Polymeric bonding(聚合物層鍵合) |
no endcapping(不封尾) |
C8-M-E |
Polymeric bonding(聚合物層鍵合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
C8-M-SE |
Polymeric bonding(聚合物層鍵合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
C8-H |
Monomeric bonding(單層鍵合) |
Polar spacer(極性官能團嵌入) |
C8-NE |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
no endcapping(不封尾) |
C8-SB |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
C4-E |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
C4-SE |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
Phenyl-E |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
Phenyl-SE |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
Phenyl-B |
Polymeric bonding(聚合物層鍵合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
CN-RP |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Liquid phase endcapping(封尾) |
CN-SE-RP |
Monomeric bonding(單分子層鍵合) |
Gas phase endcapping(全封尾) |
2、C18液相色譜填料性能-高柱效:120,000/m,當今常規反相C18液相色譜柱最高柱效的代表。